更多關(guān)于小鼠胚胎成纖維細(xì)胞的知識

　　小鼠胚胎成纖維細(xì)胞用于支持鼠和人多功能干細(xì)胞的生長。該細(xì)胞不僅能提供多能性干細(xì)胞生長的物質(zhì)，也能分泌維持干細(xì)胞多能性的關(guān)鍵生長因子。該細(xì)胞從大鼠胚胎中分離，并在早期起作用。作為飼養(yǎng)層細(xì)胞，必須通過輻射阻止該細(xì)胞的增殖。經(jīng)處理的細(xì)胞也能用于產(chǎn)生有用的培養(yǎng)基，用于自由飼養(yǎng)的多能性干細(xì)胞的培養(yǎng)。  

　　小鼠胚胎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)方法：

 

　　傳代方法 將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入6mL(/100mm皿)胰酶，在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細(xì)胞剛有脫落時，則吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約3min取出。傳代用12mL CM1-1培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打均勻細(xì)胞，后可分3~6皿培養(yǎng)；
 

　　生長條件 ：37℃，5%CO2，CM1-1培養(yǎng)液。CM1-1培養(yǎng)液：90%DMEM-H+10?S。DMEM-H：DMEM高糖培養(yǎng)液，含谷氨酰胺，丙酮酸鈉。
 

　　存儲條件：凍存則用6mL凍存液(90?S+10%DMSO)終止消化，吹打均勻，分為6支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過夜移至液氮中保存。